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400677608801、流動相
GC用氣體作流動相,又叫載氣。常用的載氣有氦氣、氮?dú)夂蜌錃?。與HPLC相比,GC流動相的種類少,可選擇范圍小,載氣的主要作用是將樣品帶入GC系統(tǒng)進(jìn)行分離,其本身對分離結(jié)果的影響很有限。
而在HPLC中,流動相種類多,且對分離結(jié)果的貢獻(xiàn)很大。換一個(gè)角度看,GC的操作參數(shù)優(yōu)化相對HPLC要簡單一些。此外,GC載氣的成本要低于HPLC流動相的成本。
02、固定相
因?yàn)镚C的載氣種類相對少,故其分離選擇性主要通過不同的固定相來改變,尤其在填充柱GC中,固定相常由載體和涂敷在其表面的固定液組成,這對分離有決定性的影響,所以,導(dǎo)致了種類繁多的GC固定相的開發(fā)研究。迄今已有數(shù)百種GC固定相可供我們選擇使用,但常用的HPLC固定相也就十幾種。
故LC在很大程度上要靠選用不同的流動相來改變分離選擇性。當(dāng)然,毛細(xì)管GC常用的固定相也不過十幾種。在實(shí)際分析中,GC一般是選用一種載氣,然后通過改變色譜柱(即固定相)以及操作參數(shù)(柱溫和載氣流速等)來優(yōu)化分離,而LC則往往是選定色譜柱后,通過改變流動相的種類和組成以及操作參數(shù)(柱溫和流動相流速等)來優(yōu)化分離。
03、分析對象
GC所能直接分離的樣品是可揮發(fā)、且熱穩(wěn)定的,沸點(diǎn)一般不超過500℃。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì),在目前已知的化合物中,有20%~25%可用GC直接分析,其余原則上均可用LC分析。也就是說GC的分析對象遠(yuǎn)沒有LC多。
需要指出的是,有些雖然不能用GC直接分析的樣品,通過特殊的進(jìn)樣技術(shù),如頂空進(jìn)樣和裂解進(jìn)樣,也可用GC間接分析。比如高分子材料的裂解色譜就是如此。這在一定程度上擴(kuò)大了GC分析對象的范圍。此外,GC比LC更適合于氣體的分析。
04、檢測技術(shù)
GC常用的檢測技術(shù)有多種,比如熱導(dǎo)檢測器(TCD)、火焰離子化檢測器(FID)、電子俘獲檢測器(ECD)、氮磷檢測器(NPD)等,其中FID對大部分有機(jī)化合物均有響應(yīng),且靈敏度相當(dāng)高,zui小檢測限可達(dá)納克級。
而在LC中尚無通用性這么好的高靈敏度檢測器。商品LC儀器常配的也就是紫外-可見光吸收檢測器(UV-Vis)和示差折光檢測器(RI)。前者的通用性遠(yuǎn)不及GC中的FID,后者的靈敏度又較低,且不適于梯度洗脫。當(dāng)然,不論GC還是LC,都有一些高靈敏度的選擇性檢測器,GC有ECD和NPD等,LC有熒光和電化學(xué)檢測器。較為理想的檢測器應(yīng)該*MS,但在這一點(diǎn)上,GC目前要優(yōu)于LC。
因?yàn)镚C流動相的特點(diǎn),它與MS的在線聯(lián)用已不存在任何問題,特別是毛細(xì)管GC與MS的聯(lián)用已成為常規(guī)分析方法。而LC與MS的聯(lián)用就受到了流動相的限制。雖然目前已有多種接口,如離子束、熱噴霧、電噴霧等,但流動相的選擇還是受到明顯的限制。
總體來說,氣相具有良好的分離能力 高靈敏度 快速分析速度 易于操作等。由于技術(shù)條件的限制,難以通過氣相色譜分析沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。通常,衍生化方法或裂解方法可用于揮發(fā)性較低或易于在500℃或更低溫度下通過加熱分解的部分。
而高效液相色譜只需要將樣品制成不需要?dú)饣娜芤海虼瞬皇軜悠窊]發(fā)性的限制。對于高沸點(diǎn) 熱穩(wěn)定性差 相對較大的分子量(超過400或更多)的有機(jī)物質(zhì)(一些物質(zhì)占總有機(jī)物質(zhì)的近75%至80%)。原則上,高效液相色譜可用于分離 分析。據(jù)統(tǒng)計(jì),在已知化合物中可以通過氣相色譜分析約20%,并且可以通過液相色譜分析約70-80%。